|
تشخیص ژنوم روتاویروس با روش جدید رنگ‌آمیزی نیترات نقره
|
الهام احمدی1   ، حوریه سلیمان جاهی* 2، علی تیموری3 |
1- دانشجوی کارشناسی ارشد رشته ویروس شناسی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس
2- دانشیار، گروه ویروس شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس ، soleim_h@modares.ac.ir
3- استادیار گروه ویروس شناسی، دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز |
|
|
چکیده: (15281 مشاهده) |
| زمینه و هدف : روتاویروس‌ها عضو خانواده رئوویرویده و دارای ژنوم RNA دو رشته‌ای بوده و مهم‌ترین عامل گاستروانتریت در نوزادان و کودکان زیر سه سال است. این مطالعه به منظور ارزیابی تشخیص ژنوم روتاویروس با دو روش رنگ‌آمیزی تغییر شکل‌یافته نیترات نقره با استفاده از الکتروفورز ژل‌پلی‌آکریل‌آمید در مقایسه با رنگ‌آمیزی مرسوم نیترات نقره انجام شد. روش بررسی : در این مطالعه توصیفی روتاویروس از 6 نمونه استاندارد کشت سلولی MA-104 آلوده با دو ویروس RV4 انسانی و RF گاوی به‌صورت مجزا استخراج شد. RNA روتاویروس از نمونه‌ها استخراج و برای تشخیص حضور ژنوم روتاویروس، الکتروفورز در ژل‌پلی‌آکریل‌آمید 10درصد انجام گردید. با استفاده از رنگ‌آمیزی نیترات نقره باندهای RNA شناسایی شدند. یافته‌ها : پس از کشت سلول و تکثیر ویروس، آثار تخریب سلولی به صورت کنده شدن سلول‌ها از بستر مشاهده شد که نشان‌دهنده تکثیر ویروس در سلول‌ها بود. حرکت الکتروفورتیک dsRNA روتاویروس سویه RF استاندارد براساس افزایش وزن مولکولی و حرکت در ژل‌پلی‌آکریل‌آمید از شماره 11-1 جداسازی شد و به‌صورت چهار قطعه سنگین، سه قطعه سه‌تایی، دو قطعه متوسط و دو قطعه کوچک با الگوی ژنومی گروه A روتاویروس تایید شد. رنگ‌آمیزی نقره و برآورد حساسیت روش با رقت‌های دوبرابری ژل مارکر مشاهده شد. کمترین رقت قابل اندازه‌گیری توسط این روش هفت پیکوگرم بود. همچنین با این روش در کمتر از 10 دقیقه رنگ‌آمیزی به‌طور مطلوب صورت گرفت. نتیجه‌گیری : روش جدید رنگ‌آمیزی نقره قابلیت تشخیص الگوی ژنومی ویروس‌ها در مدت زمان کمتر و برای نمونه‌های در حد هفت پیکوگرم را داراست. |
|
| واژه‌های کلیدی: روتاویروس، الکتروفورز ژل‌پلی‌آکریل‌آمید، رنگ آمیزی نیترات نقره |
|
|
متن کامل [PDF 447 kb]
[English Abstract]
(26431 دریافت)
|
|
نوع مطالعه: گزارش كوتاه |
موضوع مقاله:
ویروس شناسی
|
| * نشانی نویسنده مسئول: تهران، دانشگاه تربیت مدرس، دانشکده علوم پزشکی، گروه ویروس شناسی، تلفن و نمابر 82883561-021 |
|
|
|
|
|
|
| ارسال پیام به نویسنده مسئول |
|
|
